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基于海藻酸钠和金属多酚网络的益生菌涂层制备方法 

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摘要:本发明公开了基于海藻酸钠和金属多酚网络的益生菌涂层制备方法,属于新型材料应用领域,将益生菌重悬在PBS缓冲液中,然后向其中加入多酚溶液,涡旋15s分散均匀后,向其加入金属离子溶液,涡旋15s,后加入PBS缓冲液来稳定体系pH,最后通过钙离子诱导海藻酸钠涂层在益生菌表面。所述金属多酚网络是通过多酚与金属离子络合配位形成的团聚体包覆在益生菌表面。本发明的金属多酚网络涂层能够自组装快速形成,绿色环保,方便快捷,对益生菌的正常生长没有明显影响。通过透射电镜和共聚焦激光显微镜观察证实了益生菌表面的金属多酚网络涂层成功,实现了益生菌的快速涂层,保护其免受恶劣环境的影响。

主权项:1.基于海藻酸钠和金属多酚网络的益生菌涂层制备方法,其特征在于,由以下步骤组成:(1)、将培养好的益生菌用PBS缓冲液清洗三次,取适量108CFUmL的益生菌重悬在4.75-9.5mLPBS缓冲液中,缓冲液的pH值为7.2,涡旋15s以使菌体分散均匀;(2)、向其中加入50-200μL多酚溶液,涡旋15s以使多酚分散均匀;所述多酚为单宁酸、没食子酸、原儿茶酸和表没食子儿茶素没食子酸酯中的一种,且多酚溶液的浓度为10-40mgmL;(3)、然后向其中加入10-50μL金属离子溶液,迅速涡旋15s后,再向其中加入5-10mLPBS缓冲液,以稳定体系的pH;所述金属离子为铁离子、铜离子、锌离子、镁离子、铝离子、锰离子和钛离子中的一种,且金属离子溶液为10-40mgmL;(4)、将得到的菌悬液离心5000-12000rpmmin,5-10min后,得到益生菌和表面涂层;(5)、用PBS缓冲液重悬两次并离心5000-12000rpmmin,5-10min后,以去除未结合的多酚;(6)然后向其中加入100-1000μLCaCl2溶液,CaCl2溶液为10-100mM,涡旋30s,接着加入100-1000μL海藻酸钠溶液,海藻酸钠溶液的浓度为1mgmL,快速涡旋1min后,将菌悬液离心5000-12000rpmmin,5-10min后,弃上清液得到益生菌及涂层;所述益生菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、双歧杆菌和嗜热链球菌中的一种。

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