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ST IRF3/IRF7 KO细胞系及其构建方法和应用 

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摘要:本发明属于分子生物学领域,涉及STIRF3IRF7KO细胞系及其构建方法和应用,本发明针对猪源IRF3、IRF7基因序列的外显子设计特异性sgRNA,插入载体lentiCRISPRv2上,得到慢病毒载体lentiCRISPRv2‑IRF3和lentiCRISPRv2‑IRF7。将重组质粒转染HEK293T细胞后,收集慢病毒感染ST细胞。通过抗生素筛选出成功被感染的细胞,并进行测序、WesternBlot验证。本发明所述的STIRF3IRF7KO细胞系可运用于猪源病毒的基础和应用研究,也为病毒疫苗生产中细胞系的选用提供了有价值的新材料。

主权项:1.一株STIRF3IRF7KO细胞系,其特征在于,分类命名为猪睾丸上皮细胞系STIRF3IRF7KO,保藏编号为CCTCCNO:C2021178;所述细胞系为针对猪源IRF3、IRF7基因序列的外显子设计特异性sgRNA,插入载体lentiCRISPRv2上,得到慢病毒表达载体lentiCRISPRv2-IRF3和lentiCRISPRv2-IRF7,病毒表达载体共同转染HEK293T细胞;将慢病毒加入靶细胞中,接毒后,添加嘌呤霉素或潮霉素B,筛选得到目的细胞系STIRF3IRF7KO;IRF3突变基因的序列如SEQIDNO.5所示;IRF7突变基因的序列如SEQIDNO.6所示;sgRNA引物序列如下:

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百度查询: 扬州大学 ST IRF3/IRF7 KO细胞系及其构建方法和应用

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