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申请/专利权人：天津创源生物技术有限公司

摘要：本发明提供凝结魏茨曼氏菌IOB502发酵菌粉的制备方法，依据该方法中的最佳制备条件所得到的菌粉制剂，及其在制备防治胃食管反流相关药物中的应用，通过实验条件摸索和控制，得到最佳的发酵条件，所得菌粉制剂活性可达到2.68±0.11×1010CFUg以上，具有较高的菌株活性。依据该方法所得到凝结魏茨曼氏菌IOB502发酵菌粉制剂，具有较好的耐酸性，凝结魏茨曼氏菌IOB502在胆盐浓度0.5%条件下可存放4h，存活率达91.6%，具有较强的耐受酸和胆盐的能力，即具有较强的通过胃肠道能力，保持较高的存活率，能够减少其对黏膜的损伤、平衡胃酸分泌、缓解胃灼热、反酸等症状，具有较大工业生产应用价值。

主权项：1.凝结魏茨曼氏菌IOB502CGMCCNo.16025发酵菌粉在制备防治胃食管反流药物中的应用，其特征在于该菌制备方法为：（1）菌株活化：将凝结魏茨曼氏菌IOB502，CGMCCNo.16025，接种至活化培养基中进行菌株活化培养，活化好的菌种即为种子液；（2）发酵：将活化好的种子液接种到灭菌后的发酵液中，发酵罐搅拌转速100rmin，培养后得发酵液；（3）菌粉制备：将获得的发酵液进行离心，分别获得上清液和菌泥，将获得的菌泥进行真空冷冻干燥，即可获得高活凝结魏茨曼氏菌IOB502菌粉;（4）进行凝结魏茨曼氏菌IOB502菌粉的耐酸耐胆盐实验;将所得的凝结魏茨曼氏菌IOB502菌粉，在pH=2的条件下，存放2h后,在胆盐浓度0.5%的条件下进行4h存活测试;（5）进行凝结魏茨曼氏菌IOB502菌粉对胃食管反流病的调节作用验证，以SPF级雄性SD大鼠为实验动物建立反流性食管炎大鼠模型，以凝结魏茨曼氏菌IOB502发酵后菌粉进行灌胃验证;其中步骤（1）中按照体积比为1：30进行接种，步骤（2）中按照体积比为1：70进行接种;步骤（1）和（2）中的培养温度36±2℃，培养时间48±2h;步骤（1）活化培养基为TAS培养基，其配方为胰酪胨15.0g，大豆木瓜蛋白酶水解物5.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，pH=7.3±0.2，加水量为1L，121℃，灭菌20min；步骤（2）中发酵液培养基为胰酪胨15.0g，大豆木瓜蛋白酶水解物5.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，pH=7.3±0.2，加水量为1L，121℃，灭菌20min。

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