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申请/专利权人：中国科学院合肥物质科学研究院;合肥中科易康达生物医学有限公司

摘要：本发明公开同时检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV多重荧光PCR检测试剂盒，包括冻干固态PCRMix，液态复溶Buffer、冻干固态阴性对照和冻干固态阳性对照，所述冻干固态PCRMix含有WSSVVP644基因、IHHNVNS2基因、EHP18s基因和SHIVMCP基因对应的特异性引物探针序列组；所述引物和探针的序列如SEQIDNO:1‑12所示。本发明还提供使用上述试剂盒检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV的方法。本发明提供的试剂盒采用全预混冻干多重荧光PCR法，能够同时检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV这四种病原体，大大节约的检测时间，具有灵敏度高、操作技术要求低和防污染等优点。

主权项：1.同时检测对虾WSSV、IHHNV、EHP、SHIV多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：包括冻干固态PCRMix，液态复溶Buffer、冻干固态阴性对照和冻干固态阳性对照，所述冻干固态PCRMix含有WSSV上游引物序列为5’-CAATGGTCCCGTCCTCATCT-3’，下游引物序列为5’-AGCTGCCTTGCCGGAAA-3’，探针序列为5’-AGCCATGAAGAATGCCGTCTATCACACACT-3’；IHHNV上游引物序列为5’-CCATTACAGATCATGGTGACCACT-3’，下游引物序列为5’-GTAACTCCCAAATAGGCGAGG-3’，探针序列为5’-CGGACACCCAACCAATAAGACCAGA-3’；EHP上游引物序列为5’-GGGCAAAGAATGAAATCTCAAGA-3’，下游引物序列为5’-CCCAGATACGTCTAAGAGCATCG-3’，探针序列为5’-CACCTGGACCAACGGAGGCGAA-3’；SHIV上游引物序列为5’-TGGACCAAACATTTGGATTGG-3’，下游引物序列为5’-TTACGACATCAGGTTCCAGAGAAC-3’，探针序列为5’-TTCCTGACACCGAAGAAGAGAGCCTT-3’；所述WSSV、IHHNV、EHP、SHIV的探针序列的5’端分别标记荧光报告基团FAM、VIC、ROX、Cy5，3’端标记荧光淬灭基团BHQ1MGB。

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