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申请/专利权人：淮南师范学院
摘要：本发明公开了一种小叶栀子的组织培养方法，属于植物组织培养技术领域，本发明以小叶栀子带顶芽的枝条为外植体进行无根苗培养、愈伤组织诱导和增殖、愈伤组织分化和生根苗培养，快速获得了可以直接在室外种植的小叶栀子种苗，建立了小叶栀子的再生体系，为大规模扩繁生产小叶栀子幼苗提供了技术支持，缩短了小叶栀子种苗繁殖周期，较好地保持了优良性状；采用本发明抑菌液处理顶芽，污染率低至25％，无菌顶芽愈伤组织的诱导率高达93.3％，而无菌叶片的愈伤组织诱导率也达到90％，愈伤组织分化率高达96.7％。
主权项：1.一种小叶栀子的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，预处理：获取小叶栀子的顶芽，清洗，纱布包裹所述顶芽，流水冲洗，得到预处理小叶栀子顶芽；S2，无根苗培养：对S1的预处理小叶栀子顶芽消毒，切去木质化茎段，保留0.5cm顶芽，并浸泡于抑菌液，得到无菌顶芽，将所述无菌顶芽接种于启动培养基，于25℃，1500Lx光照条件下，每日光照16h，黑暗培养8h，30d得到无根苗；所述抑菌液由体积比为1：1的氨苄西林钠和硫酸链霉素组成；所述氨苄西林钠和硫酸链霉素的浓度均为50mgL；S3，愈伤组织诱导和增殖：选取S2无根苗上的新芽或叶片为外植体，将所述外植体接种于诱导培养基中，于25℃，遮光培养，得到愈伤组织；每升所述诱导培养基由MS培养基、1～2mg2,4-D、0.5～1mg6-BA组成；S4，愈伤组织分化：将S3的愈伤组织切块，接种于分化培养基，于25℃，1500Lx光照条件下，每日光照16h，黑暗培养8h，30d得到分化组织；每升所述分化培养基由MS培养基、0.03～0.05mgNAA、1.5mg～1.8mg6-BA组成；S5，生根培养：将S4分化组织的芽从基部切下，并接种于生根培养基，于25℃，1500Lx光照条件下，每日光照16h，黑暗培养8h，30d后得到小叶栀子生根苗；每升所述生根培养基由12MS培养基、0.05～0.15mgNAA、0.5mgIBA组成。
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