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申请/专利权人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
摘要：本发明涉及一种团头鲂原代肝细胞高温应激模型及其构建方法和应用，属于水产动物细胞技术领域。其在培养温度为26±0.5℃时，按照4℃h的升温速率培养团头鲂原代肝细胞，培养箱温度上升至34±0.5℃，此温度处理24h，使其发生肝细胞损伤和脂代谢障碍。本发明明确了团头鲂原代肝细胞高温应激前的培养温度、升温速率、高温应激温度及其处理时间，提出了模型建立的评价标准指标。通过团头鲂原代肝细胞高温应激模型构建，可以用于研究高温诱导的团头鲂肝脏损伤和代谢障碍的发生机制，对于研发肝脏高效保护药物或添加剂也具有重要的理论和实际意义。
主权项：1.一种团头鲂原代肝细胞高温应激模型的构建方法，其特征是步骤如下：1暂养：选取体质健康的团头鲂，置于养殖桶中暂养，每天饱食投喂；2培养：步骤1暂养结束后，提取团头鲂肝细胞，采用L15完全培养基，26±0.5℃培养72h，肝细胞贴壁面积达到80％-90％；3采集：a、去除步骤2中的培养液后，用26±0.5℃预温的PBS缓冲液清洗2-4次，采集贴壁肝细胞作为0h贴壁肝细胞样品；补充26±0.5℃预温的不含有待评价样品的L15完全培养基；将不含待评价样品的L15完全培养基作为0h细胞培养液样品；b、将细胞培养箱温度维持在26℃±0.5℃，分别于12h、24h和48h，采集肝细胞培养液和贴壁肝细胞，检测两者各项指标的变化；c、将细胞培养箱温度以4℃h的速度自26℃上升至30℃和34℃；在分别达到30±0.5℃和34±0.5℃时，维持此温度，分别于达到该温度条件下的12h、24h和48h，采集肝细胞培养液和贴壁肝细胞，检测两者各项指标的变化。
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百度查询： 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种团头鲂原代肝细胞高温应激模型及其构建方法和应用
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