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申请/专利权人：江苏省家禽科学研究所

摘要：本发明公开了丙酸钠抑制沙门氏菌毒力因子的方法及应用，包括以下步骤：将沙门氏菌菌液接种于改良马丁培养基中进行培养、得到第一菌液；将第一菌液接种于新的改良马丁培养基中进行培养，得到第二菌液；将第二菌液进行离心、洗涤、采用改良马丁溶液稀释，得到细菌悬液；将细菌悬液与丙酸钠在一定条件下进行培养，得到第三菌液；对第三菌液中的沙门氏菌的毒力因子的表达进行检测。通过检测发现不同浓度丙酸钠均可显著降低沙门氏菌毒力因子的表达。通过本发明提供的丙酸钠抑制沙门氏菌毒力因子的方法可以减弱沙门氏菌感染毒性，从而降低禽类沙门氏菌的感染和发病概率、减轻感染症状。

主权项：1.一种丙酸钠抑制沙门氏菌毒力因子的方法，其特征在于，包括以下步骤：将沙门氏菌菌液接种于第一培养基中，所述沙门氏菌菌液与所述第一培养基接种比例为1:8～12，在37℃恒温摇床中于160rpm条件下孵育16h，得到第一菌液，所述第一培养基为改良马丁培养基；将所述第一菌液接种于第二培养基中，所述第一菌液与所述第二培养基的接种比例为1:20～30，在37℃恒温摇床中于160rpm条件下孵育3h，得到第二菌液，所述第二培养基为改良马丁培养基；收集所述第二菌液，进行第一次离心处理，去掉上清液，得到第一沉淀，用无菌PBS对第一沉淀进行洗涤，然后进行第二次离心处理，收集第二沉淀，将所述第二沉淀采用改良马丁溶液稀释，得到沙门氏菌的数量为1×107CFUmL的细菌悬液；取5mL的所述细菌悬液分别加入6支试管中，往每支试管中加入5～10mL不同浓度的丙酸钠，使丙酸钠终浓度分别为0、25、50、100、200、400mmolL，在37℃温度下培养过夜，得到不同浓度的第三菌液；对所述第三菌液中的沙门氏菌的毒力因子的表达进行检测，结果证明100mM的丙酸钠降低了flgA、fliC、motA、csgB和luxS的表达，200mM的丙酸钠降低了flgA、fliC、motA、motB和csgD的表达；当所述第三菌液的OD600＝1.0时，将所述第三菌液稀释100～200倍，接种于96孔板，分别设置阴性对照组、沙门氏菌组以及丙酸钠+沙门氏菌组，在生化培养箱中37℃静置培养4、8和18h后，吸弃上清液，使用PBS清洗并晾干，加入甲醇固定15min，加入200μL1％结晶紫溶液染色1～5min，再加入180～200μL33％冰醋酸，放入酶标仪测定OD570吸光值；结果证明50、100、200mM丙酸钠显著降低了沙门氏菌生物膜形成，100和200mM丙酸钠显著降低AI-2活性；所述沙门氏菌的保藏编号为CMCC50041。

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