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申请/专利权人：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
摘要：一种虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗制备方法，本发明涉及一种传染性造血器官坏死病核酸疫苗制备方法。本发明方法：一、对IHN核酸疫苗工程菌的重悬；二、工程菌的裂解；三、工程菌蛋白的去除；四、核酸疫苗的沉淀；五、核酸疫苗的洗涤；六、核酸疫苗的溶解。本发明方法得到的核酸疫苗产量高以上，纯度高，本发明为IHN核酸疫苗的大规模制备提供方法指导。
主权项：1.一种虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗制备方法，其特征在于一种虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗制备方法按照以下步骤进行：一、IHN核酸疫苗工程菌的重悬：感受态细胞DH5α工程菌用LB液体培养基培养后离心处理，称取离心后的工程菌1g与18ml的SolutionI溶液混合，重悬工程菌；二、工程菌的裂解：向步骤一重悬后的工程菌溶液中加入40ml的SolutionII溶液，搅拌均匀后放置在冰上放置10min；三、工程菌蛋白的去除：向步骤二裂解后的工程菌溶液中缓慢加入20ml的SolutionIII溶液，搅拌均匀后在冰上放置10min；四、核酸疫苗的沉淀：向步骤三处理后的工程菌溶液在4℃、12000rpm条件下离心15min，弃掉沉淀，上清液过滤后加入0.6倍体积的异丙醇溶液，充分混匀后冰上放置10min，再于4℃、12000rpm离心10min得到核酸疫苗沉淀；五、核酸疫苗的洗涤：核酸疫苗沉淀用70％的乙醇溶液洗涤后于4℃、12000rpm离心15min弃掉洗涤液收集沉淀，重复洗涤操作2～4次；六、核酸疫苗的溶解：步骤五洗涤后的核酸疫苗沉淀放置冰上至乙醇挥发干净，加入1ml的无菌水进行溶解，即实现了虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗的制备。
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百度查询： 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 一种虹鳟传染性造血器官坏死病核酸疫苗制备方法
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