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申请/专利权人:中国热带农业科学院南亚热带作物研究所
摘要:本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种分离纯化菠萝原生质体的方法与菠萝原生质体的转化方法及其应用。本发明提供了一种分离纯化原生质体的酶解液,所述酶解液以水为溶剂,包括如下浓度的组分:氯化钾、氯化钙、甘露醇、2‑N‑吗啉代乙磺酸、牛血清白蛋白、纤维素酶R‑10、离析酶R‑10。利用本发明的酶解液可以酶解得到结构完整,活性高的菠萝原生质体。将菠萝原生质体转化菠萝CRISPRCas9基因编辑载体,可以精确地检测基因编辑载体对靶基因的编辑效率,为菠萝CRISPRCas9基因编辑育种提供有力的技术保障。
主权项:1.一种分离纯化菠萝原生质体的酶解液,其特征在于,所述酶解液以水为溶剂,包括如下浓度的组分:1.2~1.7gL氯化钾、1.0~1.2gL氯化钙、100~120gL甘露醇、1.5~2.0gL2-N-吗啉代乙磺酸、0.8~1.2gL牛血清白蛋白、10~20gL纤维素酶R-10、2~4gL离析酶R-10。
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权利要求:
百度查询: 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 一种分离纯化菠萝原生质体的方法与菠萝原生质体的转化方法及其应用
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