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申请/专利权人:南京林业大学
摘要:本发明公开了一种生物催化转化色氨酸制备吲哚苷的方法,本发明利用共培养反应体系,建立了以色氨酸为底物的生物催化转化制备吲哚苷的工艺,通过克隆色氨酸酶TnaA及黄素依赖性单加氧酶FMO,对葡萄糖基转移酶PtUGT2进行半理性设计改造,引入UDP‑glucose循环系统以保证糖供体供应,并与能实现辅因子NADPH再生的葡萄糖脱氢酶联用,进行体内共培养体系发酵,该工艺为实现吲哚苷绿色、可持续的大量合成及全年度生产提供了方法。
主权项:1.一种生物催化转化色氨酸制备吲哚苷的方法,其特征在于:包括,通过色氨酸酶、黄素依赖性单加氧酶、葡萄糖基转移酶、葡萄糖脱氢酶联用或上述酶的重组菌的联用,以色氨酸为底物生物催化制备吲哚苷;其中,所述色氨酸酶包括HaliscomenobacterhydrossisDSM1100、SediminispirochaetasmaragdinaeDSM11293、EscherichiacoliB21DE3来源的TnaA中的一种;所述黄素依赖性单加氧酶包括Hydrogenovibriosp.JE_KL2、Pseudomonadotabacterium、Methylophagasp.strainSK1来源的FMO中的一种;所述葡萄糖基转移酶为来源于Polygalatenuifolia的葡萄糖基转移酶PtUGT2突变体,所述突变体是将葡萄糖基转移酶PtUGT2氨基酸序列的第91位的甲硫氨酸替换为丙氨酸以及将第145位的丝氨酸替换为丙氨酸获得;所述葡萄糖脱氢酶包括来源于Bacilussubtilis的GDH。
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权利要求:
百度查询: 南京林业大学 一种生物催化转化色氨酸制备吲哚苷的方法
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