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申请/专利权人:烟台恒源生物股份有限公司
摘要:本发明涉及L‑天冬氨酸的生物生产方法,属于L‑天冬氨酸生产技术领域。将L‑天冬氨酸裂解酶菌株接种于培养基中,摇床振荡培养为第一代,在相同条件下继续培养第二代;以转接的培养基体积的3‑8%接种量,转接于发酵培养基中,摇床振荡培养后,将温度降到30℃继续培养,离心,弃上清液,得到菌体;加水,得到菌液;加入海藻酸钠、戊二醛,混匀均匀后,缓慢滴入CaCl2溶液中,反应后形成凝胶小球,滤除小球,用氯化钠生理盐水洗涤两次,得到固定化细胞;取固定化细胞、反丁烯二酸,调节pH=7‑8,摇床恒温振荡,得到L‑天冬氨酸;通过改性交联葡聚糖凝胶过滤柱进一步纯化,得到高纯L‑天冬氨酸。本发明含量高,产率高。
主权项:1.L-天冬氨酸的生物生产方法,其特征在于:S1:将L-天冬氨酸裂解酶菌株接种于培养基中,摇床振荡培养6-10h为第一代,在相同条件下继续培养第二代;S2:以转接的培养基体积的3-8%接种量,转接于发酵培养基中,摇床振荡培养2-4h后,将温度降到30℃继续培养5-8h,离心5-10min,弃上清液,得到菌体;S3:取1-5份离心后的菌体,加200-250份水,得到高纯菌液;S4:取5-10份高纯菌液,加入5-10份海藻酸钠、0.1-0.5份戊二醛,混合均匀后,缓慢滴入10-20份CaCl2溶液中,于30-40℃下反应150-180min,形成凝胶小球,滤除小球,用氯化钠生理盐水洗涤两次,得到固定化细胞;S5:取0.1-1份固定化细胞、5-10份质量浓度为260-300gL的反丁烯二酸,调节pH=7-8,摇床恒温振荡150-180min,得到L-天冬氨酸;通过改性交联葡聚糖凝胶过滤柱进一步纯化,其流量为0.5-2BVh,得到高纯L-天冬氨酸。
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权利要求:
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