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摘要:本发明公开了一种适用于峨眉锥栗基因组DNA的提取方法,具体为:用细胞核分离液和DTT处理峨眉锥栗组织粉末样品,收集细胞核;再使用裂解液、有机溶液等试剂提取细胞核DNA从而获得高质量DNA。实验数据表明,通过本发明提供的细胞核分离液和DTT能够有效消除峨眉锥栗中次级代谢产物的干扰,使所得DNA样本不粘稠,且产量高、成本低,能够满足三代DNA建库测序的要求。
主权项:1.一种适用于峨眉锥栗基因组DNA的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、取峨眉锥栗组织样本,并于液氮下研磨成粉末;S2、利用细胞核分离液和DTT处理粉末,收集细胞核;S3、向S2收集的细胞核中加入裂解液反应后,用氯仿和异戊醇的混合液抽提,离心取上清,再加入氯仿抽提,离心取上清,用异丙醇沉淀,离心收集DNA沉淀;S4、用乙醇溶液洗涤DNA沉淀,最后加入含RNaseA的缓冲液溶解DNA;所述细胞核分离液的pH=8.0,且每1L细胞核分离液中含有:10mMTris,8mMKCl,140mMNaCl,0.5M蔗糖,2mM亚精胺,2mM精胺,10mMEDTA,0.5%vvTritonX-100,1%wvPVP,10%vvPEG8000。
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百度查询: 武汉菲沙基因信息有限公司 一种适用于峨眉锥栗基因组DNA的提取方法
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