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一种高通量可视化快速检测人兽共患病原菌的芯片及应用 

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申请/专利权人:中国农业大学

摘要:本发明公开了一种高通量可视化快速检测人兽共患病原菌的芯片及应用。该芯片配合引物组合物、酶标亲和素等,可实现结核分支杆菌、鹦鹉热衣原体、贝氏柯克斯体和布鲁氏杆菌等4种重要人兽共患病的快速诊断,并完成布鲁氏菌包括牛种布鲁氏菌、羊种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌在内的主要基因型的鉴定,本发明能够在3‑4小时完成检测,最低检出限为1×10‑4ngμL,可用于野外、实验室等多场景快速鉴别诊断。

主权项:1.一种检测人兽共患病胞内菌的试剂盒,包括芯片、引物组合物、酶标亲和素和底物,其特征在于,所述芯片固定有结核分支杆菌特异探针、贝氏柯克斯体特异探针、鹦鹉热衣原体特异探针、布鲁氏杆菌特异探针、牛种布鲁氏杆菌特异探针、羊种布鲁氏杆菌特异探针和猪种布鲁氏杆菌特异探针,所述引物组合物包括结核分支杆菌特异引物、贝氏柯克斯体特异引物、鹦鹉热衣原体特异引物、布鲁氏杆菌特异引物、牛种布鲁氏杆菌特异引物、羊种布鲁氏杆菌特异引物和猪种布鲁氏杆菌特异引物这7种特异引物;所述结核分支杆菌特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.1的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.1的第9至第30位的单链DNA,所述结核分支杆菌特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.13,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.14,SEQIDNo.14的第1位核苷酸标记生物素;所述贝氏柯克斯体特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.2的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.2的第9至第30位的单链DNA,所述贝氏柯克斯体特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.15,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.16,SEQIDNo.16的第1位核苷酸标记生物素;所述鹦鹉热衣原体特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.3的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.3的第9至第42位的单链DNA,所述鹦鹉热衣原体特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.17,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.18,SEQIDNo.18的第1位核苷酸标记生物素;所述布鲁氏杆菌特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.4的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.4的第9至第34位的单链DNA,所述布鲁氏杆菌特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.19,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.20,SEQIDNo.20的第1位核苷酸标记生物素;所述牛种布鲁氏杆菌特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.5的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.5的第9至第33位的单链DNA,所述牛种布鲁氏杆菌特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.22,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.21,SEQIDNo.21的第1位核苷酸标记生物素;所述羊种布鲁氏杆菌特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.6的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.6的第9至第34位的单链DNA,所述羊种布鲁氏杆菌特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.23,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.21,SEQIDNo.21的第1位核苷酸标记生物素;所述猪种布鲁氏杆菌特异探针为核苷酸序列是SEQIDNo.7的单链DNA或为核苷酸序列是SEQIDNo.7的第9至第30位的单链DNA,所述猪种布鲁氏杆菌特异引物由上游引物和下游引物组成,所述上游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.24,所述下游引物的核苷酸序列是SEQIDNo.21,SEQIDNo.21的第1位核苷酸标记生物素;酶标亲和素是由免疫酶和亲和素结合得到的物质;所述底物是所述免疫酶的底物;所述人兽共患病胞内菌原体为下述至少一种:A1)结核分支杆菌,A2)布鲁氏杆菌,A3)鹦鹉热衣原体,A4)贝氏柯克斯体。

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权利要求:

百度查询: 中国农业大学 一种高通量可视化快速检测人兽共患病原菌的芯片及应用

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