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申请/专利权人：成都医学院第一附属医院;电子科技大学

摘要：本发明属于生物工程技术领域，特别是涉及一种细胞实时凋亡率检测方法，包括以下步骤：将圆形图案的ITO电极嵌入细胞培养池中，连接电化学工作站的三电极系统构建得到电化学生物传感器，并放置到光学平台上；然后，将整个光学平台放置在细胞培养箱中，通过电脑中安装的活细胞动态监测分析处理软件来接收光学平台的图像传感器的信号，进行活细胞的动态观察；将细胞培养池灭菌，加入含有细胞的悬液，加入含有待测试药物成分的培养基，进行培养；开始实验，使用光学平台观察细胞凋亡，通过电化学工作站测定细胞贴壁生长产生的电阻信号变化；采集细胞覆盖率的数据和细胞电阻信号变化数据，作图展示细胞实时凋亡率，相比于传统技术实现了实时凋亡率检测。

主权项：1.一种细胞实时凋亡率检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、在ITO电极上刻蚀形成中央圆点和周围圆形图形，并使中央圆点和周围圆形图形分隔开；然后，将ITO电极嵌入细胞培养池中；S2、将ITO层的周围圆形图形与电化学工作站的三电极系统中的工作电极相连，将ITO层的中央圆点与三电极系统中对电极相连，在细胞培养池中插入AgAgCl电极与三电极系统中参比电极相连；构建得到电化学生物传感器；S3、将构建得到的电化学生物传感器放置到光学平台上；然后，将整个光学平台放置在细胞培养箱中，通过电脑中安装的活细胞动态监测分析处理软件来接收光学平台的图像传感器的信号；S4、将细胞培养池灭菌，加入含有细胞的悬液，使细胞附着在ITO电极上形成1-4层细胞的细胞基底；然后，加入含有待测试药物成分的培养基，进行培养；或者，采用热疗工艺，加入培养基，在热疗温度进行培养；S5、开始实验，启动活细胞动态监测分析处理软件，使用光学平台实时观察培养池中细胞的凋亡变化；同时，通过电化学工作站使用阻抗检测法实时测定细胞在ITO电极上贴壁生长所产生的电阻信号变化；S6、通过活细胞动态监测分析处理软件实时采集细胞覆盖率的数据，通过电化学工作站实时采集细胞电阻信号变化数据；以时间为横坐标，以细胞覆盖率变化和电阻信号变化为纵坐标作图，展示细胞实时凋亡率。

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