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申请/专利权人:博德研究所;麻省理工学院;哈佛学院院长等
摘要:本文公开的实施方式利用RNA靶向效应子以提供具有阿摩尔灵敏度的稳健的基于CRISPR的诊断。本文公开的实施方式可以以相当水平的灵敏度检测DNA和RNA两者,并且可以基于单碱基对差异将靶标与非靶标区分开。此外,本文公开的实施方式可以以冷冻干燥的形式制备,以便于分配和护理点POC应用。这样的实施方式可用于人类健康的多种情况,包括例如病毒检测、细菌菌株分型、灵敏基因分型,和疾病相关无细胞DNA的检测。
主权项:1.一种核酸检测系统,其包括:a检测CRISPR系统,其包括:i.在激活后具有附带切割活性的检测VI型CRISPR效应蛋白,ii.一种或多种设计用于杂交至相应靶核酸序列的指导RNA,和b在激活后具有附带切割活性的一种或多种IIIa型信号放大CRISPRCsm6效应蛋白;和c一种或多种基于RNA的掩蔽构建体,其包含被所述检测VI型CRISPR效应蛋白和或所述一种或多种IIIa型信号放大CRISPRCsm6效应蛋白的附带切割活性所失活的非靶核酸序列,其中所述检测VI型CRISPR效应蛋白和杂交至相应靶核酸序列的所述一种或多种指导RNA之间的复合物形成激活所述检测VI型CRISPR效应蛋白的附带切割活性;其中激活的检测VI型CRISPR效应蛋白切割激活序列,其切割产物激活所述一种或多种VIIIa型信号放大CRISPRCsm6效应蛋白的附带切割活性;并且其中所述检测VI型CRISPR效应蛋白和所述一种或多种IIIa型信号放大CRISPRCsm6效应蛋白的附带切割活性协同作用以失活所述基于RNA的掩蔽构建体以产生或掩蔽可检测的信号。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 博德研究所 麻省理工学院 哈佛学院院长等 基于多效应子CRISPR的诊断系统
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