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申请/专利权人：蓝景科信河北生物科技有限公司
摘要：本申请公开了一种基于双重Pulldown的DNA亲和纯化测序建库方法，属于基因测序技术领域。本申请提供的方法是在生物体外，两种不同的蛋白相互结合之后，进一步与DNA结合，获得与两种蛋白复合体结合的DNA，再进行高通量测序。该方法与ChIP‑seq相比，可以解决抗体限制，重复性成功率低，需用到有毒试剂的问题；与普通DAP‑seq相比，可以对形成异源二聚体的转录因子进行结合位点检测，还能够检测两种转录因子之间的互作。
主权项：1.一种基于双重Pulldown的DNA亲和纯化测序建库方法，其特征在于，包括如下步骤：1提取目标样本的基因组DNA；2对所述基因组DNA进行DNA片段化，得到DNA片段；3将所述DNA片段进行文库构建，得到DNA文库；4获取带有不同标签的两种转录因子表达载体；5将等量的两种转录因子表达载体置于同一体外蛋白表达体系中，进行体外蛋白表达，得到表达产物；6使用不同标签蛋白纯化磁珠依次对所述表达产物进行纯化，得到纯化产物；7将所述纯化产物与步骤3中的DNA文库结合，依次进行孵育、洗脱，得到洗脱后的DNA文库；8将所述洗脱后的DNA文库进行PCR扩增，得到测序文库；9对所述测序文库进行测序、分析，即可。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 蓝景科信河北生物科技有限公司 一种基于双重Pull down的DNA亲和纯化测序建库方法
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