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申请/专利权人:南京大学;南京大学人工智能生物医药技术研究院
摘要:本发明公开了一种MHCIICDS基因的测序分型试剂盒,包括:PCR缓冲液、dNTPs、Taq酶和引物;引物由第一或第二上游引物组与下游引物组组成;第一上游引物组的序列如SEQIDNO.1‑7所示;第二上游引物组如SEQIDNO.15‑22所示;下游引物组的序列如SEQIDNO.8‑14所示,该试剂盒特异性强、灵敏度高并且操作简单快捷,大大降低了检测成本,具有广阔应用前景。
主权项:1.一种MHCIICDS基因的测序分型试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:PCR缓冲液、dNTPs、Taq酶和扩增引物,所述扩增引物由第一或第二上游引物组与下游引物组组成;所述第一上游引物组的序列如SEQIDNO.1-7所示;所述第二上游引物组如SEQIDNO.15-22所示;所述下游引物组的序列如SEQIDNO.8-14所示;所述试剂盒的使用方法包括如下步骤:1)提取样本cDNA;2)对所述cDNA进行PCR扩增;3)将所述扩增产物连接T载并测序分型;所述步骤2)的扩增程序包括:95℃3min的预变性、92℃95℃15sec的变性、48-58℃15sec的退火、72℃60sec的延伸和72℃5min的彻底延伸;所述变性、退火和延伸依次进行一次为一个循环,所述循环数目为4;第一循环的所述变性条件为92℃;第一到第三循环的所述退火重复操作3次、第四循环的所述退火重复操作25次;扩增HLA-DRA、HLA-DRB1、HLA-DRB345、HLA-DPA1、HLA-DPB1和HLA-DQA1的退火温度为从58℃开始,以2℃为单位在所述循环中依次递减;扩增HLA-DQB1的退火温度为从54℃开始,以2℃为单位在所述循环中依次递减。
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百度查询: 南京大学 南京大学人工智能生物医药技术研究院 一种MHCII CDS基因的测序分型试剂盒
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