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摘要：本发明涉及一种构建重组大肠杆菌利用甘露糖合成GDP‑岩藻糖，进而生产2′‑岩藻糖基乳糖并提高甘露糖利用率的方法，属于微生物代谢工程领域。所述工程菌以大肠杆菌为出发菌株，敲除lac操纵子序列中Plac启动子序列以及lacI、lacZ基因，并且在1acI、lacZ基因位点上过表达wcaG、gmd、lacy基因，之后在基因组上敲除磷酸甘露糖异构酶编码基因manA，过表达磷酸甘露糖变位酶编码基因manB、α‑1,2‑岩藻糖基转移酶编码基因futC、甘露糖‑1‑磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因manC所得。本发明提供的2′‑岩藻糖基乳糖从头合成途径生产2′‑岩藻糖基乳糖的发酵策略，能够大幅提高大肠杆菌发酵生产2′‑岩藻糖基乳糖碳源利用率。
主权项：1.一种以甘露糖为碳源生产2′-岩藻糖基乳糖的基因工程菌在生产2′-岩藻糖基乳糖中的应用，其特征在于，所述工程菌以大肠杆菌为出发菌株，敲除lacI、lacZ基因，并且过表达wcaG、gmd、lacy基因，之后在基因组上敲除磷酸甘露糖异构酶编码基因manA，过表达磷酸甘露糖变位酶编码基因manB、2′-岩藻糖基乳糖合成酶编码基因futC、甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶编码基因manC所得；发酵制备2′-岩藻糖基乳糖的方法如下：将工程菌种子液按2-10%接种量发酵培养基中，30-37℃，400-600rpm，培养36-52h；发酵培养基组成如下：1.5-3.5gLKH2PO4，1.5-3.5gLNH4Cl，1.7-2.5gL柠檬酸，1.4-2gLMgSO4·7H2O，5-7gL酵母粉，10-20mLL微量元素溶液，1-10gL甘露糖，10-15gL甘油，5-10gL乳糖，其余为水。
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百度查询： 天津科技大学 山东合成远景生物科技有限公司 一种利用甘露糖合成2′-岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌及其应用
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