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NADP依赖型甲酸脱氢酶突变体、辅酶再生体系及其在制备L-草铵膦中的应用 

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申请/专利权人:浙江工业大学

摘要:本发明公开了一种NADP依赖型甲酸脱氢酶突变体、辅酶再生体系及其在制备L‑草铵膦铵盐中的应用,所述甲酸脱氢酶突变体是将SEQIDNo.2所示氨基酸序列的第198位、第221位、第246位、第272位或第379位中的一个或多个突变获得的。本发明甲酸脱氢酶突变体对NADP有较高亲和力,能高效地为氧化还原体系不断提供NADPH,突变体ApFDH‑A1对NAD的活力提高了0.38倍,对NADP的活力提高了11倍。利用甲酸脱氢酶突变体构建辅酶循环体系制备L‑草铵膦中,200mM底物转化率高达100%、副产物二氧化碳易于排出反应体系,产物分离纯化更方便,具有很好的应用前景。

主权项:1.一种NADP依赖型甲酸脱氢酶突变体,其特征在于,所述甲酸脱氢酶突变体是将SEQIDNo.2所示氨基酸序列突变为下列之一:(1)第198位丙氨酸突变为甘氨酸、第221位天冬氨酸突变为谷氨酰胺、第246位谷氨酸突变为甘氨酸、第272位精氨酸突变为亮氨酸、第379位组氨酸突变为丝氨酸;(2)第198位丙氨酸突变为甘氨酸;(3)第198位丙氨酸突变为甘氨酸、第221位天冬氨酸突变为谷氨酰胺;(4)第198位丙氨酸突变为甘氨酸、第221位天冬氨酸突变为谷氨酰胺、第272位精氨酸突变为亮氨酸;(5)第198位丙氨酸突变为甘氨酸、第221位天冬氨酸突变为谷氨酰胺、第246位谷氨酸突变为甘氨酸;(6)第198位丙氨酸突变为甘氨酸、第221位天冬氨酸突变为谷氨酰胺、第272位精氨酸突变为亮氨酸、第246位谷氨酸突变为甘氨酸;(7)第198位丙氨酸突变为甘氨酸、第221位天冬氨酸突变为谷氨酰胺、第272位精氨酸突变为亮氨酸、第246位谷氨酸突变为甘氨酸、第379位组氨酸突变为赖氨酸。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 浙江工业大学 NADP依赖型甲酸脱氢酶突变体、辅酶再生体系及其在制备L-草铵膦中的应用

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