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申请/专利权人：暨南大学;广东善百年特医食品有限公司

摘要：本发明属于轻工油脂领域，公开了一种高效液相色谱串联质谱检测分析同酸甘油二酯区域异构体含量的方法。本发明基于对同酸甘油二酯衍生化处理后，使得甘油二酯中未与脂肪酸结合的羟基连接新的基团异氰酸酯，生成对应的1,2‑DAG异氰酸酯衍生物或1,3‑DAG异氰酸酯衍生物，使用液质联用仪对同酸甘油二酯衍生物进行分析，通过衍生物在碰撞诱导解离下产生的两种子离子相对含量差异对同酸甘油二酯区域异构体含量进行定量分析。本方法可以在无需色谱分离甘油二酯区域异构体的前提下，仅使用常规的C18色谱分析，即可实现甘油二酯区域异构体定量，减少了对特殊手性色谱柱使用或特定色谱分离技术的开发。

主权项：1.一种甘油二酯及其异构体的分析方法，其特征在于包括以下步骤：1将异氰酸酯溶液和同酸甘油二酯混合，同时加入稳定剂，进行衍生化处理，衍生化处理结束后除去溶剂，得到同酸甘油二酯的衍生物；2将得到的同酸甘油二酯的衍生物用有机溶剂溶解后，通过薄层色谱分离纯化，获得纯净的同酸甘油二酯的衍生物；3将纯化后的同酸甘油二酯的衍生物用溶剂溶解，并加入磷酸盐缓冲液，然后注入到高效液相色谱串联质谱仪中检测分析，得到[AA]+和[AB]+两种碎片离子的百分比含量，其中A代表的是脂肪酸，B代表的是异氰酸酯；然后计算对应的[AB]+离子相对含量，其中[AB]+离子相对含量％＝[AB]+离子百分比含量[AB]+离子百分比含量+[AA]+离子百分比含量；4将步骤1中的同酸甘油二酯分别用纯1,2-DAG、纯1,3-DAG代替，或者分别用纯1,2-DAG、纯1,3-DAG以及纯1,2-DAG和纯1,3-DAG的混合物代替，然后重复步骤1-3，得到对应的[AB]+离子相对含量，同时计算对应的sn-ABA相对含量，sn-ABA相对含量％＝sn-ABA含量sn-AAB含量+sn-ABA含量，其中sn-ABA为1,3-DAG异氰酸酯衍生物，sn-AAB为1,2-DAG异氰酸酯衍生物，A代表的是脂肪酸，B代表的是异氰酸酯；再以[AB]+离子相对含量作为纵坐标，sn-ABA相对含量为横坐标构建标准曲线，不同的脂肪酸对应得到不同的标准曲线；5将步骤1中的同酸甘油二酯替换为待测甘油二酯，然后重复步骤1-3，得到对应的[AB]+离子相对含量，然后将[AB]+离子相对含量代入到步骤4中相应脂肪酸的标准曲线中，得到sn-ABA相对含量，即得到待测甘油二酯中对应1,3-DAG的相对含量。

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